Agar Sangre de carnero
El agar sangre es una combinación de un agar base (agar nutritivo) con el agregado de 5 % de sangre ovina,1también puede usarse sangre humana, para cultivos en una placa de Agar. El agar sangre aporta muchos factores de enriquecimiento. Se usa también para ver la capacidad hemolítica de los microorganismos patógenos (Koneman & Allen, 2008). Observando los halos hemolíticos alrededor de las colonias se determina el tipo de hemólisis que posee (Imagen 1):
- Alfa: halos verdosos (oxidación de la hemoglobina de los glóbulos rojos a metahemoglobina en el medio).
- Beta: halos incoloros (hemolisis total).
- Gamma: inexistencia de halos (sin hemolisis).
(Koneman & Allen, 2008)
Imagen 1. Clasificación de hemolisis en agar sangre.
Fundamento:
Dada la excelente base nutritiva, permite el crecimiento de prácticamente todos los microorganismos que pudieran estar presentes. Si se añade sangre se pueden determinar las distintas formas de hemólisis que pudieran tener lugar. Si se calienta se obtiene el Agar Chocolate, también muy empleado. Por la adición de distintos antibióticos se obtienen medios con caracteres selectivos (Koneman y Allen, 2008).
Fórmula (por litro):
Infusión de Corazón (a partir de 375 g)........ 10,0 g
Peptona de Carne .......................................... 10,0 g
Sodio Cloruro ................................................ 5,0 g
Agar Agar....................................................... 15,0 g
pH final:7,3 ±0,2
Preparación:
Suspender 40 g en 1 L de agua destilada; calentar y agitar hasta ebullición y hervir durante 1 minuto. Esterilizar a 121 °C durante 30 minutos (para cantidades de más de 1 litro). Homogeneizar y distribuir en tubos de ensayo y esterilizar a 121 °C durante 15 minutos. Para preparar placas de Agar Sangre incorporar 5 a 8% de Sangre desfibrinada antes de distribuir en placas. Para una mejor conservación de la placa de Agar Sangre y para obtener halos hemolíticos más claros ajustar el pH a 6,8 ±0,2. Si se utiliza como medio basal se obtendrán mejores crecimientos a pH 7,3 ±0,2 (Koneman y Allen, 2008) .
Modo de empleo:
Sembrar las placas en la superficie del medio. Incubar a 37 °C de 24 a 48 horas. Agar Sangre, es un agar que permite el crecimiento (Tabla1) de microorganismos difíciles (Staphylococcus y Streptococcus) que no son capaces de crecer en otros medios como el agar CLED (Koneman y Allen, 2008) .
Tabla 1. Morfología típica del crecimiento de posibles colonias en agar sangre.
La información de la morfología típica de las colonias es muy util.
ResponderEliminar